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原核表达载体和真核表达载体
cDNA方面的一些疑问
答:
没有区别。从同一段cDNA扩增得到的DNA片段既可以克隆入
原核载体
,在
原核
细胞中
表达
,也可以克隆入
真核载体
,在真核中表达。不过,为了提高在真核细胞中的表达效率,可以在紧邻起始密码子前面加一个六个碱基的kozak序列(通常使用GCCACCATG,ATG就是起始密码子)。如果表达效率还是不能满足要求,可以考虑把...
DNA与蛋白质相互作用的研究方法有哪些
答:
GST 融合蛋白是在
原核表达
的,所以没有经过过多的象
真核
细胞内具有的蛋白修饰作用。所以另一种用来检验相互作用的蛋白也可以用原核表达出来,也就是所谓的重组蛋白。当 GST融合蛋白把重组蛋白沉淀下来,然后用重组蛋白的抗体作 Western blotting 检测。(2) GST 融合蛋白与体外 TNT 系统合成的多肽或蛋白的相互作用用来...
原核
生物的DNA插入
真核
生物是否会有
表达
答:
只要插入的区域是基因区,有启动子终止子,应该就可以转录,就可以
表达
。但是这个可能性很小,大部分都不会表达,有一些会导致
真核
生物被植入基因片断失效,只有极小一部分会表达。所以一般都是把DNA插入plasmid,中文不记得了,好像叫质粒吧。因为所有生物都是用DNA作为遗传信息
载体
,同样的转录方式(大体...
免疫学技术知识总结 第二章
答:
可溶性抗原:可溶性抗原的来源主要是天然纯化,或者用目的基因在
原核
细胞或者
真核
细胞中
表达
,可溶性抗原需要与弗氏佐剂完全或不完全混匀,才可以进行免疫。 (1) 完全抗原的提取:细胞破碎法、抗原提取、抗原的纯化 (2)半抗原与
载体
的交联:载体的选择、半抗原与载体偶联的方法、偶联复合物的鉴定 (3)合成肽抗原:免疫原性...
请问什么是穿梭质粒
载体和表达
质粒载体?
答:
穿梭质粒是指可以在多种宿主下复制。比如说通常能够在哺乳动物,酵母或者其他细菌复制
表达
的质粒,同时可以在大肠杆菌内复制。这样利于对质粒的分子生物学操作和大量制备。表达质粒就是指带有启动子,增强子等等,使其在宿主体内不仅仅是可以复制,还能够通过转录翻印,在宿主内表达出相应蛋白的质粒 ...
真核
生物中存在质粒吗?或质粒只存在
与原核
生物中吗?
答:
真核
生物中存在质粒,质粒并不是只存在
与原核
生物中。质粒广泛存在于生物界,细菌、植物、动物等生物体中都含有质粒,真核生物与原核生物中都含有质粒。质粒具有自主复制能力,使其在子代细胞中也能保持恒定的拷贝数,并
表达
所携带的遗传信息,但质粒的功能可自行丢失或人工处理而消除。
为什么说
真核
细胞的基因含有不
表达
的DNA片段,不能直接用于基因的扩增...
答:
真核
生物的基因分编码区和非编码区,而非编码区又有外显子和内含子,内含子是不能编码为蛋白质的,所以不能直接用于基因的扩增。人工合成基因是有目的的合成的,不含内含子,再说你要内含子也没有用,不是吗/
真核
生物基因在
原核
生物里
表达
应如何操作
答:
通过基因工程手段,用特定的限制性内切酶,切割目的基因和质粒
载体
,然后用DNA连接酶连接,用氯化钙或者电刺激处理
原核
生物细胞,把带有目的基因的载体导入原核生物即可.
lac, pro基因的作用
答:
启动子是DNA链上一段能与RNA聚合酶结合并起始RNA合成的序列,它是基因表达不可缺少的重要调控序列。没有启动子,基因就不能转录。由于细菌RNA聚合酶不能识别
真核
基因的启动子,因此
原核表达载体
所用的启动子必须是原核启动子。原核启动子是由两段彼此分开且又高度保守的核苷酸序列组成,对mRNA的合成极为...
...加完标签之后想要用
真核表达
蛋白,应该加什么标签啊?
答:
理论上,都是可以用于
真核表达
的,这些标签只要不会影响蛋白本身活性就没有任何问题。给你举个离子,在植物转基因中,就有一经典方法检测蛋白表达情况的,就是在蛋白后面带上his tag,然后待转基因植株出来后,就用抗his taq的抗体(商用的,有卖)做western或者ELISA去检测和定量转入的蛋白。这种方法...
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