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原核表达载体和真核表达载体
如何设计实现多基因串联重组
原核表达载体
答:
2. 选择载体:在选择载体时,需要考虑载体的类型、大小、复制起始位点、选择标记和启动子等元素。常用的
原核表达载体
包括质粒和噬菌体。质粒载体具有易于操作、稳定性高和容量大的优点,适用于大多数原核生物。噬菌体载体具有较高的转染效率和表达能力,但操作较为复杂。在选择载体时,还需要考虑其与目标...
基因
表达载体
上的复制原点有特异性吗
答:
质粒通常只在原核细胞复制,少数人工构建的表达T抗原的真核细胞,比如293T也支持质粒复制。由于原核
和真核
细胞需要的启动子不相同,所以用于
真核表达
的质粒和用于
原核表达
的质粒有不同的启动子等表达元件。
原核
细胞
与真核
细胞的相同点
答:
2. 胞浆:相同点:
原核
细胞
和真核
细胞都包含胞浆,这是细胞内的液体基质,其中包含了各种细胞器和分子。意义:胞浆中的细胞器和分子是细胞进行各种生物化学过程的场所,包括代谢、蛋白质合成、能量生产等。3. DNA:相同点:原核细胞和真核细胞都包含DNA(脱氧核糖核酸),它是遗传信息的
载体
。意义:...
急,如何构建
原核表达载体
答:
大体分为一下几步:1.设计目的片段引物(含限制性酶切位点,要求:表达载体上有而目的片段上没有的酶切位点)2.PCR扩增片段 3.扩增后的片段与pMD18/19T克隆载体连接,通过蓝白斑筛选,提质粒并酶切鉴定;将正确连接的克隆载体重组质粒酶切,回收目的片段 4.目的片段
与表达载体
连接 5.转化到DH5a等...
真核
细胞
与原核
细胞的区别
视频时间 06:33
一文解读:质粒
载体及
各个组成元件
答:
在质粒的元件设计中,pcDNA3.1图谱为我们揭示了关键区域:复制起点、筛选标记(如AmpR、KanR,抗生素抗性基因用于阳性克隆的筛选)和多克隆位点。穿梭质粒(如pcDNA3.1)的独特性在于它具备两个复制起点,支持在
原核和真核
细胞中的
表达
。除了这些,还有转录调控和翻译表达元件、蛋白标签等特殊元件,例如,...
原核表达载体
的原核表达载体调控原件
答:
(1) 将连接产物转化大肠杆菌DH5α,根据重组
载体
的标志(抗Amp或蓝白斑)作筛选,挑取单斑,碱裂解法小量抽提质粒,双酶切初步鉴定。(2)测序验证目的基因的插入方向及阅读框架均正确,进入下步操作。否则应筛选更多克隆,重复亚克隆或亚克隆至不同酶切位点。(3) 以此重组质粒DNA转化
表达
宿主菌的...
真核
生物
与原核
生物在翻译其实过程中有哪些区别
答:
个人认为比较大的区别有两点:因为
原核
生物没有成型的细胞核,转录和翻译都在细胞质中进行,所以可以边转录边翻译,而真核生物会先转录再翻译,时间顺序有所差别 第二就是原核生物
和真核
生物的密码子不同,所以翻译过程对应碱基与氨基酸不同
PCR产物的检测方法有哪些
答:
用于电泳检测PCR产物的琼脂糖浓度常为1%—2%,应该使用纯度高的电泳纯级琼脂糖,这种琼脂糖已除去了荧光抑制剂及核酸酶等杂质。(1)制胶 琼脂糖凝胶厚度约为3~5mm。过薄则加样孔样品会溢出来,过厚观察时荧光穿透不强以至有些小片段DNA带型不易分辨。如配制2%凝胶100ml,称取琼脂糖2g于三角瓶中,...
求详细的基因
表达载体
的组成,要详细啊~···
答:
完整的
表达载体
必须包括:1、复制子,在细菌中扩增时所必须。2、启动子,目的基因在细菌或细胞中转录所必须,转录了才能翻译,是谓“表达”。3、
原核
筛选标记,细菌增菌所必须。4、真核筛选标记,如果是
真核表达
,就是必须的。5、多克隆位点,即酶切位点,插入目的片段的区域。6、其他所需构件,可视...
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