非常风气网www.verywind.cn
首页
原核表达载体和真核表达载体
为什么有些人类基因不能在
原核表达载体
正确表达
答:
异源的,凡是外来物质都会被生物体视为入侵物,会被防御系统所识别,通过降解等方式达到排除污染的目的。再一个一个是
真核
系统,一个是
原核
系统,原核系统缺少一些真核蛋白正确折叠和修饰所需要的条件。还有一个原因就是人类的基因往往过大,导致原核系统不能有效翻译。
已知氨基酸序列怎么构建
原核
质粒
答:
至于抗性基因,因为所有质粒都要在大肠杆菌中扩增,所以都带有大肠杆菌的某种耐药基因.至于真核耐药基因则不一定,
原核表达载体
肯定不需要真核耐药基因,
真核表达载体
则有些有真核耐药基因,有些没有.另外,原核细胞的kana耐药基因
和真核
细胞的neo耐药基因是同一个基因.
...留作久用,请大家推荐
表达
效率不错的
原核载体
,比如pET,pT7-7,pGEM...
答:
VP3是一种能特异性诱导恶性肿瘤细胞凋亡的病毒蛋白。由于它是一种不能透过细胞膜的大分子蛋白,目前主要通过
真核表达载体
将其基因导入肿瘤细胞内表达而发挥作用。因转基因操作困难、真核表达效率较低且其临床应用的安全性近年来受到了质疑,因此如能在体外制备出VP3蛋白并通过有效的方法将其导入肿瘤细胞内...
质粒图谱4大要素
答:
质粒中有两个 origin 的,为穿梭质粒,既可以在原核细胞复制,也可在真核细胞中复制。二、筛选标记: 多为抗性基因,以便加以检测筛选;只存在单抗性的质粒多为原核克隆
载体 和原核表达载体
。而存在两种或以上的抗性的多为
真核表达
质粒,多为穿梭质粒 真核表达质粒不仅含 如AmpR ,还有如NeoR 筛选...
真核表达载体
转染293,序列都正确,不表达是什么原因
答:
一般的话,原因答题是可以分为两种:①不表达,从基因上开始分析,无论是用那种宿主表达蛋白,
真核表达
或是
原核表达
,都要考虑到基因优化的层面,如果基因本身不适在此系统中表达,那么下游在怎么优化也是不表达的 ②表达条件的优化,转染效率是否转染成功,细胞培养细胞生长的状态,这些条件是可以通过自己...
含有NdeⅠ和EcoR Ⅰ酶切位点的复制
载体和表达载体
答:
根据我们实验收藏,
原核表达载体
Pet-28a比较复合你的要求,而复制载体一般用T载体吧。如果你要的是
真核表达载体
,我查看了PCMV系列的,都没有Ndel的多克隆位点。不太适合,不过Ndel这个限制性内切酶如果可以尽量少用,改有其他酶切位点要好点。
求Plasmid DNA的提取方法
答:
一般用碱裂解法 1.试剂盒方法 从培养的平板上挑取单个分离良好的白色菌落,接种到含有抗生素的3ml LB液体培养基中,37℃280rpm振荡培养过夜; 吸取1.5ml菌液于1.5ml离心管中,10000rpm离心5min,弃上清; 加入250 μl Buffer P1,重悬菌体; 加入250μl ...
...个基因的序列及其所属物种,如何通过试验方法获得该基因的
表达
...
答:
第二步 将编码序列克隆到表达载体上:
原核表达载体
或
真核表达载体
最好带标签的(例如his6,gst 目的为了检测和纯化)第三步 载体转化宿主,进行目的基因的表达。通过标签进行纯化 === 以上是通过基因工程技术外源表达的方法 如果想获得内源蛋白 如下 获得该蛋白的抗体(通过基因工程产物...
真核原核表达
系统的优缺点?
答:
原核的:周期短,蛋白表达量高,但是如果用来表达真核的蛋白,活性可能受到影响。真核的:蛋白表达活性一般较好,但是周期相对较长,一般是首先考虑
原核表达
,无效表达或者表达出的蛋白活性太低的时候才选用真核。但
真核表达
比如酵母表达系统,有时候融合蛋白蛋白糖基化可能会改变蛋白的分子量,进而改变其一些重要的生物学功能...
构建的
原核表达载体
,测序也正确,为什么有的就不表达目的蛋白?
答:
先测序看看序列是不是三的倍数,保证是连接到
载体
上,并且载体也是转入
表达
菌的,不行的话,通常做法是调节诱导剂浓度,诱导时间,不行就换载体,如BL21换ROSSETTA等,再不行就换载体。其实我也遇到,有个蛋白始终没有表达,没办法放弃了。
<涓婁竴椤
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
涓嬩竴椤
灏鹃〉
你可能感兴趣的内容
本站内容来自于网友发表,不代表本站立场,仅表示其个人看法,不对其真实性、正确性、有效性作任何的担保
相关事宜请发邮件给我们
©
非常风气网