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可溶性蛋白测定注意事项
可溶性蛋白
质含量的
测定
答:
检测
原理:考马斯亮蓝G-250(Coomassie brilliant blueG-250)
测定蛋白质
含量属于染料结合法的一种。该染料在游离状态下呈红色,在稀酸溶液中当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色,前者最大光吸收在465nm,后者在595nm在一定蛋白质浓度范围内(1-1000μg)),蛋白质与色素结合物在595nm波长下的吸光度与...
ELISA 实验
注意事项
知多少
答:
总的来说,因为ELISA只能
检测可溶性蛋白
的含量,所以应保证所有样本均为澄清的液体,沉淀或悬浮物都应离心去除。 为了保证
检测的
准确性,保存于-20℃或-80℃的样本最好在1~6个月内检测;4℃保存的样本应在1周内进行检测。 另外,还应保证样本不含NaN3,因为NaN3会抑制HRP的活性,从而导致假阴性的结果。 试剂的准备 按...
发酵豆粕的
可溶性蛋白
怎么测?
答:
将匀浆杯放在37℃的水浴中,浸泡搅拌5min,在内切式组织匀浆机上匀浆10min,从匀浆杯中取出浆液移入600ml烧杯中,待浆液分层后,移出40ml上清液注入50ml离心管中,并在2700r/min的转速下离心10min,移取15ml上清液于凯氏烧瓶中,
测定
上清液中蛋白质含量和样品总蛋白含量,计算溶解
可溶性蛋白质
的数量。
测定
植物体内
可溶性蛋白
有什么意义和用途?
答:
可溶性蛋白
为重要的渗透调节物质和营养物质,他们的增加和积累能提高细胞的保水能力,对细胞的生命物质及生物膜起到保护作用,因此经常用作筛选抗性的指标之一。可溶性蛋白是植物抗旱性的重要指标之一。可溶性蛋白指可以以小分子状态溶于水或其他溶剂的蛋白。通常在植物生理、微生物、食品加工等实验中作为重要...
关于
可溶性蛋白质
的提取和鉴定
答:
按照蛋白的提取方式提取就行了。一般有些步骤都是不变的,破碎--离心--提取 提取的话看你要提取的蛋白的性质进行选择。有电泳,盐析,HPLC。提取后纯化该蛋白,可以采用凝胶柱进行分离,然后进行SDS-page,确定分子量大小,还可以进行蛋白测序。然后可以通过X光衍射确定蛋白结构。具体
蛋白质
生物功能
测定
法...
考马斯G250法测
可溶性蛋白
,离心机13000转会不会把可溶性蛋白甩下来?
答:
许多文献上测
可溶性蛋白
的转数都不一样,我以前用4000转,有篇文献上看到用13000转,同时还可以用这溶液测酶含量,我想问下:用4000转和13000转对可溶性蛋白的影响... 许多文献上测可溶性蛋白的转数都不一样,我以前用4000转,有篇文献上看到用13000转,同时还可以用这溶液测酶含量,我想问下:用4000转和13000转对...
干扰
可溶性
糖
测定
的主要因素有哪些怎样避免
答:
样品中可能含有的
蛋白质
等物质,可以增加对照组
测定
;样品中含有不可溶的糖类纤维素或未溶解的糖类淀粉等,可以提前过滤。干扰
可溶性
糖测定的主要因素是样品中可能含有的蛋白质、氨基酸等物质,在测定吸光度时有影响。避免方法是需要在测定样品前应该除去或增加对照组测定,避免影响定吸光度;样品中很可能含有...
测定
植物体
可溶性蛋白
含量有什么意义和用途?试举二例说明。
答:
许多可溶性蛋白质是构成果蔬中酶的重要组成部分,参与果蔬多种生理生化代谢过程的调控,与果蔬的生长发育、成熟衰老,抗病性、抗逆性密切相关。此外,在研究每一种酶的作用时常以比活力(酶活力单位/毫克蛋白质,Unit/mg Protein)表示酶活力大小及酶制剂纯度。因此,就需要经常
测定可溶性蛋白质
的含量。
可溶性
表达的
蛋白
如何纯化?纯化后如何除咪唑?
答:
如果咪唑不影响活性
的检测
手段),一般来讲,咪唑不会对蛋白的活性有太大影响。如果脱咪唑之前就已经没有活性,那就不是脱咪唑的问题,而是要往前追溯问题。比如,有无移码、tag对蛋白性质影响如何、破细胞的方法是否影响蛋白等等。对
可溶性蛋白
的表达及纯化,我有多年经验,若有疑问,欢迎继续讨论。
做
可溶性蛋白
试验的牛血清蛋白的保存温度?
答:
要用专门的冰箱-4°C 能保存1周左右
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