非常风气网www.verywind.cn
首页
得到大量原核表达的X蛋白
在
原核
生物中
表达
真核
蛋白
应注意什么问题?
答:
可能没有生物学活性等,但是要是做免疫原应该没问题 2.首先要看其序列信息,分析其密码子,由于
原核
与真核生物的密码子偏好性不同,所以有时可能会出现稀有密码子而影响
表达的
情况 3.要注意你要
表达蛋白
的大小问题,一般情况下大于70KD的蛋白在原核菌种不容易表达或表
大量
低 ...
原核表达
,为什么空载
表达的
很好,目的
蛋白
没有表达,可能的原因有...
答:
目的
蛋白的表达
跟基因本身关系密切,载体,表达条件关系也很大。空载体能表达不代表你
的蛋白
能在该条件下表达。
真核生物
蛋白
如何在
原核
生物中
表达
答:
LZ想说的应该是能表达出这种
蛋白
的基因 那先要
获取表达
出此蛋白的基因(目的基因)然后将此基因整合进
原核
生物的DNA中 若要检测目的基因是否表达,可以将一段可以表达出抗药性的基因与目的基因一同转入,之后可将抗生素加入被植入目的基因的原核生物培养基中,则存活下来的个体就能将该蛋白合成 ...
原核表达
1.1 表达载体
答:
为了
获得
高效的基因
表达
产物,科研人员设计出多种具备不同特性的表达载体,以适应不同目的基因的表达需求,综合考虑了转录、翻译、
蛋白质
稳定性及胞外分泌等多个方面。常用的表达载体质粒元件包括启动子、多克隆位点、终止密码子、融合Tag(如存在)以及复制子等。复制子的选择通常倾向于高拷贝数,如pSC101...
原核表达蛋白
大小偏小
答:
解决的方法可以采用两端都带有融合标签的载体,例如pET系列部分载体在N-端和C-端都有His-Tag融合标签。这样,全长
蛋白
就可以通过提高咪唑浓度,在洗脱时将截短蛋白与全长蛋白区分开。或者在蛋白两端采用不同标签,进而通过亲和纯化的方式
得到
全长蛋白。影响蛋白稳定性的另外一个因素是与N端Met相邻的氨基酸...
利用
原核表达的蛋白表达
量怎么越来越低了?
答:
如果楼主你的实验设计没任何问题,并且你的实验步骤也很严谨的,但是你就是找不出原因来的哈耶正常哈!生物实验有时很诡异的!~楼主你也不要着急哈,你换个人或者换个环境再做做看看,所不定就行了!~~~楼主好运!!!~~~
外源基因在
原核
细胞中
表达
时
蛋白质
的存在形式有哪些?
答:
当外源基因在
原核
细胞中
表达
时,蛋白质的存在形式主要包括:1. 游离蛋白质(Free proteins):外源基因被转录和翻译后,产生
的蛋白质
可以以游离的形式存在于细胞质中。这些蛋白质可以执行其特定的功能,例如催化化学反应、结合DNA或其他分子等。2. 融合蛋白质(Fusion proteins):有时,在外源基因表达时...
原核表达
产物纯化后有一条非目的
蛋白
条带,怎么办
答:
如果有抗体,做个western blot判断下,是杂带还是降解片段;如果是杂带,优先考虑优化你使用的纯化方案,如Ni柱,考虑延长washing buffer的时间和提高咪唑浓度,使用分辨率更好的填料;还去不掉,考虑用2步或3步纯化,比如用离子交换、凝胶过滤。个人见解,仅供参考,祝一切愉快!
跨膜
蛋白表达
技术有哪些类型?
答:
原核表达
技术:通过将目标跨膜蛋白基因导入原核生物(如大肠杆菌)中,利用其自身的代谢系统来
表达蛋白
。酵母表达技术:利用酵母菌的表达系统来表达跨膜蛋白,可以通过质粒介导的方式将目标基因导入酵母细胞中。昆虫细胞表达技术:利用昆虫细胞(如昆虫细胞系Sf9)来表达跨膜蛋白,常常结合昆虫细胞病毒表达系统...
真核表达载体和
原核表达
载体的区别越详细越全面越好
答:
表达的话,一般原核是直接转化细菌通过ISPG诱导进行表达,
蛋白表达
后的形式一般是通过包涵体或者是分泌型蛋白存在,这种蛋白如果是真核基因来源,不一定拥有相应的蛋白生物活性,因为原核表达缺少真核转录后的蛋白修饰机制。但是
原核表达的蛋白
容易纯化,很容易
获得
纯化蛋白做为免疫原等进行使用。而真核表达则是...
<涓婁竴椤
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
涓嬩竴椤
灏鹃〉
你可能感兴趣的内容
本站内容来自于网友发表,不代表本站立场,仅表示其个人看法,不对其真实性、正确性、有效性作任何的担保
相关事宜请发邮件给我们
©
非常风气网