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蛋白原核表达定义
怎样探知
蛋白质
的
表达
答:
1、宿主。
表达蛋白
的生物体。可以为细菌、酵母、植物细胞、动物细胞等。由于各种生物的特性不同,适合表达蛋白的种类也不相同。2、载体。载体的种类与宿主相匹配。根据宿主不同,分为
原核
(细菌)表达载体、酵母表达载体、植物表达载体、哺乳动物表达载体、昆虫表达载体等。载体中含有外源基因片段。通过载体...
如何确定一个
蛋白
选用真核表达还是
原核表达
、
答:
一般真核生物来源的
蛋白质
用真核表达,原核生物来源的用
原核表达
,因为真核生物和原核生物有密码子偏好,比如说同一个氨基酸可以由A和B两种密码子编码,真核生物偏好A,含有A的序列在真核中表达量较高,否则,含有B的序列表达量很低。
如何得到基因的
原核表达蛋白
,并通过免疫动物得到特异性抗体
答:
要得到基因的
原核表达蛋白
,先要考虑表达的载体,pET系列载体是目前应用最为广泛的原核表达系统,已经成功地在大肠杆菌中表达了各种各样的异源蛋白。一般的pET载体是先在不含DE3片段的菌株中进行克隆筛选,之后再把阳性克隆转化进入表达菌株,如BL21 DE3中,通过IPTG诱导进 行表达。通过扩大培养的体积获得...
原核表达
载体和真核表达载体的区别
答:
2、PCR产物双酶切后回收,在T4DNA连接酶作用下连接入载体。真核细胞表达载体之一为pEGFP-N1载体,具有对方面的优点。pEGFP-N1载体上携带有EGFP
蛋白表达
基因。二、表达实现方式不同:
原核表达
载体测序验证目的基因的插入方向及阅读框架均正确,进入下步操作。否则应筛选更多克隆,重复亚克隆或亚克隆至不同酶...
原核
生物
表达
系统的构建原则是什么?
答:
原核表达
系统中通常使用的可调控的启动子有lac(乳糖启动子)、trp(色氨酸启动子)、tac(乳糖和色氨酸的杂合启动子)、lpl (l噬菌体的左向启动子)、t7噬菌体启动子等。(1)lac启动子:它来自大肠杆菌的乳糖操纵子,是dna分子上一段有方向的核苷酸序列,由阻遏
蛋白
基因(laci)、启动基因(p)、操纵基因(...
大家
原核表达
出一个基因的
蛋白
后,可以继续做哪些
答:
大家
原核表达
出一个基因的蛋白后,可以继续做哪些 1、Operon操纵子:一个或几个结构基因与一个调节基因和一个操纵基因,加上启动子构成一个操纵单元,这个单元称为操纵子。在操纵子中,结构基因产生mRNA并作为模板合成
蛋白质
;而调节基因则产生一种阻遏蛋白与操纵基因相互作用;阻遏蛋白与操纵基因结合从而...
原核
生物是如何进行基因
表达
的?
答:
1、Operon操纵子:一个或几个结构基因与一个调节基因和一个操纵基因,加上启动子构成一个操纵单元,这个单元称为操纵子。在操纵子中,结构基因产生mRNA并作为模板合成
蛋白质
;而调节基因则产生一种阻遏蛋白与操纵基因相互作用;阻遏蛋白与操纵基因结合从而阻碍了结构基因转录成为mRNA;在诱导过程中,诱导物...
原核表达
系统中通常使用的可调控的启动子有哪些?
答:
原核表达
系统中通常使用的可调控的启动子有lac(乳糖启动子)、trp(色氨酸启动子)、tac(乳糖和色氨酸的杂合启动子)、lpl (l噬菌体的左向启动子)、t7噬菌体启动子等。(1)lac启动子:它来自大肠杆菌的乳糖操纵子,是dna分子上一段有方向的核苷酸序列,由阻遏
蛋白
基因(laci)、启动基因(p)、操纵基因(...
问个问题哦,我进行的是
原核蛋白表达
,表达载体是PET32a,表达菌液超声...
答:
首先得判断
蛋白
条带是否正确,因为32a表达过程中,会在目标蛋白上加上部分自己序列,所以电泳图谱中你所要表达的蛋白,应该比你自己预期的大20-30kDa。其次,
原核表达
,只是表达了酶蛋白序列,但蛋白序列与酶之间不能划等号,要有一个正确的加工之后形成合适的二、三级结构,蛋白才有活性 ...
蛋白表达
系统的植物表达系统
答:
因此,选择表达系统时,应充分考虑各种因素,如要
表达蛋白
的性质、生产成本、表达水平、安全性、表达周期等。随着对外源基因表达系统研究的不断深入,随着更多表达机理和影响因素的发现,相信在不久的将来,
原核
与真核两种表达系统在重组蛋白的生产研究中仍然都会占有一席之地,并将出现更多更加完善的表达系统...
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