在原核表达蛋白时,挑重组菌后放入LB液体培养基中培养10h(忘记加卡那霉素),之后再取100ul转移到10ml的培养基(加了卡那霉素)中扩大培养,由于用的是原核表达载体PET28a,属于卡那抗性,这样影响大不大?
理论上影响是比较大的,原核LB培养不加抗生素的话,很容易出现丢失了带有外源基因质粒的生长速度比目的菌的生长速度快得多的情况。最后的结果就是影响目的蛋白的表达量。
所以如果这个蛋白表达培养的实验是第一次做的话,建议重做一遍以保证数据的准确。如果不是第一次做的话,可以对比下之前的表达数据验证下是否有影响。
所以如果这个蛋白表达培养的实验是第一次做的话,建议重做一遍以保证数据的准确。如果不是第一次做的话,可以对比下之前的表达数据验证下是否有影响。
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