如题所述
PCR的结果并不一定需要构建到载体上才能测序,一般来说也可以回收PCR片段后根据已知序列直接合成相应引物进行测序,只是这样做有一点不好,因为测序引物结合的部分及下游50~100bp左右的片段可能会由于测序的原因而不是很准,故还需要设计反向引物往回测序;而构建到载体上后测序,用载体的通用测序引物测序就不需要考虑这一点了。此外,一般来说,质粒测序比PCR片段直接测序的成功率与测序结果质量都会要好一些,一般推荐构建到载体上进行测序。
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