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可溶性蛋白测定的试剂
可溶性蛋白质测定
答:
所需仪器与用具包括721分光光度计、量筒、研钵、烧杯、量瓶、移液管等。
试剂有标准蛋白质溶液、90%乙醇、85%磷酸以及考马斯亮蓝G-250溶液
。考马斯亮蓝G-250溶液需称取100μg考马斯亮蓝G-250,溶于50mL 90%乙醇中,加入85%磷酸100mL,最后用蒸馏水定容至1000mL,贮存在棕色瓶中,常温下可放置1...
可溶性蛋白
质含量的
测定
答:
可溶性蛋白质含量的测定:进行测定时,
加Folin—酚试剂时要特别小心
,因为该试剂仅在酸性pH条件下稳定,但上述还原反应只在pH=10的情况下发生,当Folin一酚试剂加到碱性的铜—蛋白质溶液中时,必须立即混匀,以便在磷钼酸—磷钨酸试剂 被破坏之前,还原反应即能发生。考马斯亮蓝G-250在游离状态下呈红...
福林酚比色法
原理
答:
原理蛋白质与福林(Folin)-酚试剂反应
,产生蓝色复合物。作用机理主要是蛋白质中的肽键与碱性铜盐产生双缩脲反应,同时也由于蛋白质中存在的酪氨酸与色氨酸同磷钼酸-磷钨酸试剂反应产生颜色。呈色强度与蛋白质含量成正比,是检测可溶性蛋白质含量最灵敏的经典方法之一。此法的显色原理与双缩脲方法是相同...
福林酚法检测可溶性蛋白质的
原理
答:
(1)在碱性条件下,蛋白质与铜作用生成蛋白质—铜络合物。
(2)此络合物将试剂磷钼酸—磷钨酸(FolIn试剂)还原
,混合物深蓝色(磷钼蓝和磷钨蓝混合物),颜色深浅与蛋白质含量成正比。此方法操作简便,灵敏度比双缩脲法高100倍,定量范围为5~100μg蛋白质。FolIn试剂显色反应由酪氨酸、色氨酸、半...
做
可溶性
还原糖与
蛋白质的检测
实验,化学
试剂
的用法有何不同
答:
检测还原糖:菲林试剂的NaOH和CUSO4需混匀后使用
,且现配现用 检测蛋白质:双缩脲试剂应先加NaOH,造成碱性环境,再加CUSO4
做生物组织中
可溶性
还原糖、脂肪、
蛋白质的
鉴定实验时,需要根据实验需 ...
答:
(3)
蛋白质
的鉴定需要选择黄豆,鉴定蛋白质选择
的试剂
是双缩脲试剂,包括两种成分,双缩脲试剂A液是NaOH,双缩脲试剂B液是CuSO4.故答案为:(1)梨 斐林试剂 砖红色沉淀(2)苏丹ⅢD(3)黄豆 双缩脲试剂A和双缩脲试剂B NaOH CuSO4 ...
下列关于鉴定
可溶性
还原糖、脂肪和
蛋白质
时所用
的试剂
及出现的颜色正...
答:
鉴定还原糖需要使用斐林
试剂
,产生砖红色沉淀,或者是本尼迪特试剂,产生红黄色;脂肪需要使用苏丹Ⅲ(苏丹Ⅳ)染色,使用酒精洗去浮色以后在显微镜下观察,可以看到橘黄色(红色)的脂肪颗粒;
检测蛋白质
需要使用双缩脲试剂,产生紫色反应.故选:A.
可溶性蛋白
质含量的
测定
答:
考马斯亮蓝G-250(Coomassie brilliant blueG-250)
测定蛋白质
含量属于染料结合法的一种。该染料在游离状态下呈红色,在稀酸溶液中当它与
蛋白质的
疏水区结合后变为青色,前者最大光吸收在465nm,后者在595nm在一定蛋白质浓度范围内(1-1000μg)),蛋白质与色素结合物在595nm波长下的吸光度与蛋白质含量...
设计性实验:植物组织内
可溶性蛋白质的
提取和含量
测定
答:
组成和规格:无色透明的提取
试剂
50 ml或100 ml。贮存: 4°C,密封避光1年。用途: 提取多种植物组织和细胞的
可溶性
和疏水性
蛋白
。如苹果、花生、土豆、烟叶、菠菜、梅花等。操作步骤:1. 组织匀浆,必须充分匀浆,此步骤非常关键:(1) 冻存组织匀浆:预先将研钵置于-20°C ~-70°C冰箱内冷冻。
测定
植物体内
可溶性蛋白
质含量的方法有哪些?
答:
双缩脲法;Folin-酚
试剂
法;考马斯亮蓝法;紫外吸收法;具体可参考植物生理生化实验原理和技术这本书。
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