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表达蛋白大小和预测不符
重组
蛋白大小
比
预测
的大10kda左右是什么原因啊?
答:
得知重组
蛋白大小
比
预测
的大10kda左右的原因,首先需要确认这一信息。若通过电泳分离方法检测,需要注意电泳速率受到多种因素影响,不仅分子量是关键。对于这类疑问,建议采取纯化蛋白后使用质谱分析的策略。质谱分析能够提供精确的分子量信息,有助于确认实际大小。在进行质谱分析时,确保操作准确无误至关重要。
求助生物达人,基因序列推测
蛋白质
序列
预测
值和实际值差异很大。人生迷茫...
答:
1.由于你的
蛋白
上加上的HIS标签,碱性氨基酸在电泳的时候会和某些离子结合,故而泳动的比较慢,所以跑出来的带往往要比实际大很多。你可以换个标签试试看。2.你再确认下终止密码子有没有问题哈?
为什么western blot band条带的
大小和预测
的分子量大小不同?
答:
大部分常见的原因如下:1.翻译后修饰—比如
蛋白
的磷酸化,糖基化等,这些都会增加蛋白的分子量
大小
。2.翻译后剪切—比如很多蛋白首先被合成为前体形式,然后通过剪切获得生物学活性,比如pro-caspases。3.剪接变异体—相同的基因,经过选择性剪接会产生不同分子量大小的蛋白。4.相对电荷—氨基酸的组成 (带...
蛋白
分子量比预期偏大20kD是怎么回事
答:
可能是你的电泳不均匀
比如电流方向不垂直于胶孔 也有可能那个颜色最深的不是你的目的蛋白而是一个杂质 不知道这个是你纯化后的蛋白还是纯化前的 如果是纯化后的应该只有一条带 好几条带就证明纯化得不好 建议用液相色谱来纯化
为什么
蛋白质
的分子量小于
预测
值?
答:
蛋白质分子量可能会小于预测值,
可能以下几个原因:翻译后修饰:蛋白质在翻译过程中可能会经历各种修饰
,例如磷酸化、甲基化、糖基化等。这些修饰会改变蛋白质的质量,使其分子量增加。剪切变体:某些蛋白质可能具有多个可产生剪切变体的位点。剪切变体指的是通过剪切机制在不同位点上产生的具有稍微不同...
怎样根据碱基序列分析出
表达
出
蛋白质大小
答:
要根据碱基序列分析出
表达
出
蛋白质大小
可以粗略分析 用碱基数除以3就是目的蛋白的氨基酸数,用氨基酸数乘以110就是目的蛋白的分子量,然后加上融合蛋白标签的分子量就是最后表达的融合蛋白加目的蛋白的总分子量。如果要精确分析,那就是根据碱基序列去NCBI数据库搜索,应该是有准确的分子量在NCBI数据库里 ...
原核
表达
分子量特别小,跑胶是不是看不到啊
答:
如果是蛋白的话,这个和分子量大小其实没
多大
关系,一般分子量小的话,你需要根据你的
蛋白预测大小
来调整PAGE胶的浓度,选择合适的浓度胶来跑,不然你的蛋白会因为跑出胶而看不到。然后如果你的胶浓度正确的话(一般看和你蛋白对应的Marker是否跑出胶),还看不到蛋白带,那么只有可能是你的
蛋白表达
量...
如何确定凝胶电泳上的
蛋白
条带就是所
表达
外源基因产物
答:
首先你根据目的基因
预测
目的
蛋白
的
大小
然后根据
表达
情况,在预测附近找特异条带(野生对照),特异条带往往比较浓,因为你目的基因往往插在表达载体的强启动子下游,而且有诱导剂的诱导,表达量很大。如果表达量很低,在胶上分辨不出来,你可以根据重组蛋白设定抗体,做western-blot,这个灵敏度高,只要表达...
为什么不同方法对比结果
蛋白质
序列分析和结构
预测不
同
答:
蛋白质结构
预测
过程不同来源或者不同生物功能
的蛋白质
可能有相似的结构,通常实验结果为了对采用profile-profile 方法获得的目标序列和模板序列的排列结果有
蛋白质
组学得到的差异蛋白怎么分析
答:
如果研究的目标是寻找疾病的生物标志物,进一步分析差异蛋白的诊断、
预测
和治疗价值。7. 功能实验 设计功能实验,以深入了解差异
表达蛋白
在特定生理和病理过程中的作用。在进行这些分析的过程中,保持统计和数据分析的严谨性是关键。实验设计的合理性、样本
大小
、实验重复、多重比较校正、实验验证等方面都应该...
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