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原核表达体系
真核
原核表达
系统的优缺点?
答:
原核表达体系
的缺点是:(1)缺乏合适的转录后加工机制,因此不宜表达真核生物基因组基因;(2)缺乏合适的翻译后加工机制,因此表达产物不能适当折叠和修饰;(3)很难在大肠杆菌表达体系中表达大量的可溶性蛋白。真核表达体系的有点:(1)既能表达cdna,也能表达真核基因组dna;(2)表达产物适当修饰并区域化分布。缺点是:...
IPTG 诱导
表达
答:
IPTG诱导表达
原核表达
系统将外源基因引入原核细胞,将外源基因引入原核细胞,并使其在原核细胞中高效地表合成基因产物的
体系
。达、合成基因产物的体系。原核生物基因表达特点原核生物中功能相关的基因串联在一起,形成操纵子。形成操纵子。操纵子(操纵子(operon)是一组功能上相关,)是一组功能上相关,...
原核表达
外源基因的应用
答:
原核表达
外源基因的应用主要集中在基础研究、药物研发、生物技术应用、农业应用这些方面。相关内容如下:1、基础研究:通过原核表达系统,科学家可以方便地大量制备纯化的外源基因编码的蛋白质,用于基础研究和药物研发。例如,研究蛋白质的结构和功能,或者探究基因表达调控的机制。2、药物研发:许多疾病的治疗...
原核体系
中
表达
真核基因的困难
答:
主要是
原核表达体系
的翻译后加工修饰修饰不完善(化学修饰:如乙酰化、甲基化、糖基化、泛素化……),无法赋予表达产物本来的活性;另外原核体系表达的蛋白常以包涵体的形式表达,纯化困难,另外蛋白经变性复性后可能会影响蛋白的生物学功能。其他的问题你再查查相关的书吧 ...
基因
原核表达
的详细过程
答:
构建人resistin基因
原核表达
载体并观察其表达,为开展对resistin的研究打下实验基础。【方法】 酚氯仿一步法从一位2型糖尿病合并胆管癌患者腹壁皮下脂肪组织抽取总RNA,RT-PCR法扩增出resistin基因cDNA,经测序后,PCR产物亚克隆入T载体,用EcoRI和KpnI分别酶切重组T质粒和原核表达载体pGENKS,然后resistin基因片段和表达载体...
求
原核表达
详细步骤
答:
基本步骤:目的基因的扩增、载体与目的基因双酶切、电泳、割胶回收、目的基因与载体的连接反应、重组体筛选、验证重组体、转化入大肠杆菌进行
表达
。问题在于:目的基因如何获取,扩增策略的决定,表达载体的选择,双酶切选择哪一对限制性内切酶,如何筛选重组体等等。
简述
原核
生物基因
表达
调控模式及其分子机制?
答:
原核
生物基因的
表达
调控最重要的特点是操纵子模式,从调控水平来看主要在转录水平,即对RNA合成的调控,翻译水平次之。通常有两种方式:①起始调控,即启动子调控;②终止调控,即衰减子调控。
原核
基因组的调控机制:通过负调控和正调控因子所进行的复合调控,阻遏蛋白与操纵基因结合,妨碍RNApol与P结合形成...
蛋白
原核表达
答:
原核表达
的核心其实用到的是分子生物学中我们学过的乳糖操纵子模型。乳糖操纵子模型主要有负调控和正调控,这里主要用的是负调控的机制。我们使用IPTG(异丙基硫代半乳糖苷)做为诱导剂。在没有乳糖存在时,lac操纵子处于阻遏状态。I序列在PI启动序列操纵下表达的Lac阻遏蛋白与O序列结合,抑制转录启动。当...
目的基因重组
表达
载体的构建及在
原核
中的表达
答:
目的基因重组
表达
载体的构建及在
原核
中的表达是生物技术领域的重要研究内容。目的基因重组表达载体的构建是将目的基因与适当的调控序列(如启动子、转录终止信号序列等)和标记基因连接在一起,形成重组表达载体。这个过程通常需要使用限制性核酸内切酶和连接酶等工具酶,以确保重组载体的正确性和稳定性。在原...
原核表达
载体必须具备哪些基本结构
答:
启动子 启动子是DNA链上一段能与RNA聚合酶结合并起始RNA合成的序列,它是基因表达不可缺少的重要调控序列。没有启动子,基因就不能转录。由于细菌RNA聚合酶不能识别真核基因的启动子,因此
原核表达
载体所用的启动子必须是原核启动子。 原核启动子是由两段彼此分开且又高度保守的核苷酸序列组成,对mRNA的...
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