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融合表达蛋白没有活性
重组蛋白和
融合蛋白
是同一个东西吗?
答:
融合蛋白
(fusion protein)有两种不同的含义,一种是通过DNA重组技术得到的两个基因重组后的
表达
产物。另一种含义就是介导两个细胞质膜融合的一组蛋白,如在仙台病毒脂双层外侧小叶中含有的两种糖蛋白之一,介导病毒被膜与宿主细胞质膜的融合作用。另一种糖蛋白是血细胞凝集素神经酰胺酶。 两个不同的蛋白...
常用标签
蛋白
大盘点(亲和吸附标签篇)
答:
GST标签,由211个氨基酸组成,大小约为26kDa,广泛应用于重组
蛋白融合表达
与亲和纯化。GST标签在大肠杆菌和酵母菌等宿主细胞中表达,能提高表达量,增大
融合蛋白
的可溶性,促进正确折叠,提高蛋白产量,有助于后续纯化。GST标签保留了融合蛋白的抗原性和生物
活性
,并方便使用不同的蛋白酶去除标签。然而,GST...
蛋白纯化时纯化不到
融合蛋白
,有哪些原因
答:
很多种原因,举例如下:
没有表达
;构建质粒操作设计缺陷;表达系统选择不合适;纯化标签没有充分暴露;纯化工艺需要优化;……
DNA与
蛋白质
相互作用的研究方法有哪些
答:
在许多的细胞生命活动中,例如DNA复制、mRNA转录与修饰以及病毒的感染等都涉及到DNA与
蛋白质
之间的相互作用的问题。重组DNA技术的发展,人们已分离到了许多重要的基因。现在的关键问题是需要揭示环境因子及发育信号究竟是如何控制基因的转录
活性
。为此需要:a、鉴定分析参与基因
表达
调控的DNA元件;b、分离并鉴定这些顺式元件...
做原核
表达
的时候将基因与载体蛋白构成
融合蛋白
后蛋白分子量会不会...
答:
不会变化 如果你对这个答案有什么疑问,请追问,另外如果你觉得我的回答对你有所帮助,请千万别忘记采纳哟!
既然细胞有糖
蛋白
识别 那为什么细胞可以
融合
呢.??
答:
也就是说人和小鼠的细胞膜可以连接在一起。印象中例子二的实验好像是让两个细胞的细胞质有一部分相连,经过一段时间后发现两个细胞合成了一个球形的新细胞,观察
融合
后的细胞膜发现两种糖蛋白均匀分布。糖蛋白是决定细胞与细胞之间的互相识别,细胞融合是把两个细胞合成一个,跟糖
蛋白没有
什么关系 ...
4、诱导细胞
融合
的方法有哪些?
答:
优点:融合率较高,对各种动物细胞都适宜,且仙台病毒能在鸡胚中大量繁殖,容易培养;缺点:仙台病毒不稳定,在保存过程中
融合活性
会降低,并且制备过程比较烦琐。此外,病毒引进细胞后,可能会对细胞的生命活动产生干扰。3.聚乙二醇PEG诱导融合 聚乙二醇PEG具有强烈的吸水性以及凝聚和沉淀
蛋白质
的作用,能够...
杆状病毒表达系统的影响
蛋白质表达
的因素
答:
若用融合型转移载体则不必带上;⑥转移载体中已含有多聚腺苷酸加尾信号,外源基因无需再带上这类信号;⑦如果表达产物的信号肽不能被杆状病毒表达体系有效去除时,可考虑去除这类信号肽;⑧若表达产物不能稳定表达时,可对其N端进行改造或
表达融合蛋白
。除此以外,细胞的种类和生理状态也是重组病毒繁殖的...
蛋白质
和方酵母能适应变化环境,二者有何作用?是如何合作的?
答:
形成两个非荧光的N端和C端多肽片段。这两个荧光蛋白片段分别连接到一对可以相互作用的靶蛋白上。当两种
融合蛋白
在细胞内共
表达
或体外混合时,由于靶蛋白的相互作用,荧光蛋白的两个片段在空间上相互靠近,相互补充,从而重构出具
有活性
的完整荧光蛋白分子,从而产生荧光。可视化是BiFC技术的最大特点。
哺乳动物细胞
表达
的难点和解决方案,都帮你整理好了
答:
FLAG-tag 系统可在非变性条件下进行纯化,能得到高纯度、
有活性
的
蛋白
,但其缺点为纯化介质较为不稳定,且纯化成本高上许多[5]。 另一常用的标签为GST-tag,一个26kDa 的蛋白,其特点是
表达
量高,具高度抗原性,常用来增加目标蛋白的溶解度,但常常会影响目标蛋白的特性,一般推荐纯化后将标签去除[8]。 而Strep-tag...
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