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诱导表达蛋白上清和沉淀都有
哺乳动物细胞
表达与
纯化服务的区别是什么?
答:
哺乳动物细胞
表达与
纯化服务是指将基因编码
的蛋白质表达
在哺乳动物细胞中,并将其纯化出来,以获得纯洁的蛋白质。哺乳动物细胞表达服务包括:基因工程:将目标基因插入哺乳动物细胞中,以表达所需的蛋白质。细胞培养:将哺乳动物细胞培养在合适的培养基中,以促进蛋白质表达。蛋白质纯化:使用各种纯化技术,...
硫酸铵分级
沉淀蛋白质
的原理和方法是什么啊?
答:
用此方法可以将主要的免疫球从样品中分离,是免疫球蛋白分离的常用方法。高浓度的盐离子在蛋白质溶液中可
与蛋白质
竞争水分子,从而破坏蛋白质表面的水化膜,降低其溶解度,使之从溶液中
沉淀
出来。各种蛋白质的溶解度不同,因而可利用不同浓度的盐溶液来沉淀不同
的蛋白质
。这种方法称之为盐析。盐浓度通常...
做wb,直接收集细胞
沉淀
冻起来可以吗
答:
做wb,可以直接收集细胞
沉淀
冻起来,以备下一步实验所用。
蛋白质
印迹法(免疫印迹试验)即Western Blot。它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或...
如果要分离一个抗菌
蛋白
需要哪些步骤啊?
答:
8℃一个月以上或-5至-20℃一年以上。2.用0.1% SDS在2~8℃透析三次,10000×g离心10分钟取
上清
即可用于Western Blot。常见问题分析:得率低:A.样品裂解或匀浆处理不彻底。B.最后得到
的蛋白质沉淀
未完全溶解。蛋白质降解:组织取出后没有马上处理或冷冻。电泳时条带变形:蛋白质沉淀洗涤不充分。
如何分离,提纯白
蛋白
球蛋白的方法
答:
一.血清ǐ-球
蛋白
的初步提取 1. 血细胞与血清分离:取人血液 1000ml,放置10min, 1000rpm离心20min .弃
沉淀
,留
上清
备用(沉淀为血细胞,上部为血清).2. 乳糜粒分离:4000rpm 10°C离心10分钟,采用密度梯度离心 梯度液配置:离心管下部3/4容积加血浆,上部1/4容积加0.5MnaCl+0.3MEDTA,PH7.4 ...
如何以大肠杆菌质粒DNA为载体克隆一个编码
蛋白
的基因,并使之在大肠杆菌...
答:
一般程序如下: 获得目的基因-准备表达载体-将目的基因插入表达载体中 (测序验证)-转化表达宿主菌-
诱导
靶蛋白的表达-
表达蛋白
的分析-扩增、 纯化、进一步检测。 [主要试剂 主要试剂] 主要试剂 1、LB 培养基。 2、 100mM IPTG (异丙基硫代-β-D-半乳糖苷) 2.38g IPTG 溶于100ml ddH2O ...
硫酸铵
沉淀
法的原理
及
步骤
答:
4.将溶液放在磁力搅拌器上搅拌 6 小时或搅拌过夜( 4 ° C ),使
蛋白质
充分
沉淀
。(三)透析 1.蛋白质溶液 10 000 ′ g 离心 30 min ( 4 ° C )。弃
上清
保留沉淀;2.将沉淀溶于少量( 10-20ml ) PBS -0.2g /L 叠氮钠中。沉淀溶解后放入透析袋对 PBS -0.2g /L 叠氮钠透析 ...
高中生物,为什么噬菌体实验
沉淀
物会有微量放射性
答:
噬菌体侵染细菌后,
蛋白
外壳留下细胞壁外,核酸进入细胞内部.通过剧烈振荡,使病毒衣壳从细菌菌体上脱落.离心后,菌体
沉淀
,其余组分(包括病毒衣壳)留在
上清
.如果用放射性同位素标记病毒衣壳,上清液会带有放射性;同时有少量衣壳仍停留在菌体上随菌体一起沉淀,所以沉淀物中含少量放射性.用32P标记的噬菌体...
请问
蛋白质
提取的试剂有什么?
答:
二、植物组织
蛋白质
提取方法 氯醋酸—丙酮
沉淀
法 1、在液氮中研磨叶片 2、加入样品体积3倍的提取液在-20℃的条件下过夜,然后离心(4℃8000rpm以上1小时)弃
上清
。3、加入等体积的冰浴丙酮(含0.07%的β-巯基乙醇),摇匀后离心(4℃8000rpm以上1小时),然后真空干燥沉淀,备用。4、上样前加入...
测酸性
蛋白
酶时如何溶解酪蛋白?
答:
我上学的时候做过这个实验,而且是我硕士论文的实验。。。当时和你一样,怎么都溶解不完全,很抓头。。。后来发现,为什么要让酪
蛋白
溶解完全呢?蛋白酶测定只要最后有酪蛋白被酶分解就可以显色了啊,溶解多少用多少呗。。。于是,按照实验方法溶解了一些酪蛋白,然后离心,取
上清
做实验。。。结果很好。
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