非常风气网www.verywind.cn
首页
可溶性蛋白质含量的测定方法
可溶性蛋白质测定
答:
在进行蛋白质含量测定前,需先绘制标准曲线,
取6支具塞试管,配制含0-100μg/mL的牛血清蛋白质液,每支试管加入5mL考马斯亮蓝G-250溶液
,放置2分钟后,用1cm光径比色杯在595nm下比色,绘制标准曲线。接着,吸取样品提取液1.0mL,放入具塞试管中,加入5mL考马斯亮蓝G-250溶液,充分混合后放置2...
可溶性蛋白质含量的测定
答:
考马斯亮蓝G-250(Coomassie brilliant blueG-250)
测定蛋白质含量
属于染料结合法的一种。该染料在游离状态下呈红色,在稀酸溶液中当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色,前者最大光吸收在465nm,后者在595nm在一定
蛋白质浓度
范围内(1-1000μg)),蛋白质与色素结合物在595nm波长下的吸光度与蛋白质含量...
可溶性蛋白质含量的测定
答:
可溶性蛋白质含量的测定
:进行测定时,加Folin—酚试剂时要特别小心,因为该试剂仅在酸性pH条件下稳定,但上述还原反应只在pH=10的情况下发生,当Folin一酚试剂加到碱性的铜—蛋白质溶液中时,必须立即混匀,以便在磷钼酸—磷钨酸试剂 被破坏之前,还原反应即能发生。考马斯亮蓝G-250在游离状态下呈红...
测定
植物体内
可溶性蛋白含量
有什么意义和用途
答:
(1)样品的提取:称取鲜样0.5g,用5ml蒸馏水或缓冲液研磨提取。取1.0ml(视
蛋白质含量
适当稀释)样液加入试管中,然后重复步骤2的(2)、(3)、(4),以标准曲线中的0管为空白,
测定
吸光值。(2)根据吸光值查标准曲线,求出比色液中的蛋白质含量。三、结果计算 样品中
蛋白的
含量(mg/g...
测定
植物体内
可溶性蛋白质含量的方法
有哪些?
答:
双缩脲法;Folin-酚试剂法;考马斯亮蓝法;紫外吸收法
;具体可参考植物生理生化实验原理和技术这本书。
考马斯亮蓝
法
测
可溶性蛋白的
标准曲线的公式是什么
答:
蛋白质与考马斯亮蓝G-250结合在2min左右的时间内达到平衡,完成反应十分迅速;其结合物在室温下1h内保持稳定。该
法
是1976年Bradford建立,试剂配制简单,操作简便快捷,反应非常灵敏,灵敏度比Lowry法还高4倍,可测定微克级
蛋白质含量
,
测定蛋白质浓度
范围为0~1 000μg/mL,最小可测2.5μg/mL蛋白质...
设计性实验:植物组织内
可溶性蛋白质的
提取和
含量测定
答:
1. 取上清液加入5倍体积的甲醇(或者丙酮)混匀,-20°C至少1小时沉淀蛋白质。2. 12000 g离心15分钟沉淀蛋白。3. 弃去上清。自然干燥蛋白沉淀,依据试验将沉淀溶于相应的缓冲液。如进行Western Blot 亦可用提取试剂溶解。常见问题及解决
方法
:1. 提取的蛋白量少:1) 组织
蛋白含量
较少,如水果等,可...
福林酚
法检测可溶性蛋白质的
原理
答:
(1)在碱性条件下,蛋白质与铜作用生成蛋白质—铜络合物。(2)此络合物将试剂磷钼酸—磷钨酸(FolIn试剂)还原,混合物深蓝色(磷钼蓝和磷钨蓝混合物),颜色深浅与
蛋白质含量
成正比。此
方法
操作简便,灵敏度比双缩脲法高100倍,定量范围为5~100μg蛋白质。FolIn试剂显色反应由酪氨酸、色氨酸、半...
蛋白质
定量bca法
答:
蛋白质定量BCA法是一种常用的蛋白质
测定方法
,全称为Bicinchoninic Acid Assay,简称BCA法。该方法利用双缩脲反应来
测定蛋白质浓度
,具有较高的灵敏度和准确性。BCA法的原理是蛋白质中的肽键与铜离子(Cu²⁺)可以发生双缩脲反应,生成
可溶性的
络合物。在这个反应中,蛋白质浓度与络合物的形成...
怎么鉴别
可溶性蛋白质
答:
取样品澄清液2毫升,先加入1毫升0.1克/毫升的氢氧化钠溶液,振荡后加入4滴0.01克/毫升的硫酸铜溶液并振荡,如变紫色,就说明含
可溶性蛋白质
,否则不含
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
涓嬩竴椤
灏鹃〉
你可能感兴趣的内容
可溶性蛋白测定实验步骤
考马斯亮蓝测量可溶性蛋白
干品可溶性蛋白测定
蛋白的可溶性怎么判断
可溶性蛋白质考马斯亮蓝干样
蛋白溶解度的测定
可溶性蛋白含量计算公式
可溶蛋白测定方法
可溶性蛋白吸光值多大正常
本站内容来自于网友发表,不代表本站立场,仅表示其个人看法,不对其真实性、正确性、有效性作任何的担保
相关事宜请发邮件给我们
©
非常风气网