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真核细胞蛋白表达纯化
最常用的
真核细胞表达
载体有哪些?各在哪些细胞中表达?
答:
1.pCMVp-NEO-BAN载体 特点:该
真核细胞
表达载体分子量为6600碱基对,主要由CMVp启动子、兔β-球蛋白基因内含子、聚腺嘌呤、氨青霉素抗性基因和抗neo基因以及pBR322骨架构成,在大多数真核细胞内都能高水平稳定地表达外源目的基因.2.pEGFP,增强型绦色荧光
蛋白表达
载体(Enhanced Fluorecent Protein Vector)特...
CHO
细胞
和HEK293细胞哪个用来转染好?谢谢啦!!
答:
CHO
细胞
即中国仓鼠卵巢细胞,是目前表达外源蛋白最多最成功的细胞之一。该细胞属于成纤维细胞,是一种非分泌型细胞,自身很少分泌内源蛋白,因此有利于目的蛋白的
纯化
分离 HEK293细胞是
真核蛋白表达
常用的细胞之一,它具有以下优势: 更快的生长速度,更高的生长密度、转染效率和外源蛋白表达量 各有各的...
蛋白质
融合标签
答:
3×Flag可免疫原性和与抗体的亲和性得到极大增强,适用于
真核生物
低水平
表达
的
蛋白
的检测和
纯化
。目前,市场上已有很多可供选择的商业化Flag及 3×Flag抗体。 5) S S标签,是一段来源于胰腺核糖核酸酶 A(RNase A)N 末端的短肽,氨基酸序列为KETAAAKFERQHMDS。 通常将 S-tag 构建到目标蛋白的 N 末端或 C ...
怎样扩增
蛋白质
答:
有几种方法:1. 是已知
蛋白
的话可以去NCBI查DNA 序列,构建质粒,在细菌或
真核细胞
中
表达
,过柱
纯化
。2. 未知蛋白需要先打质谱,确定氨基酸序列,再推测DNA序列,构建质粒,在细菌或真核细胞中表达,过柱纯化。3. 制作此蛋白抗体,选择适当的细胞(细胞中有此蛋白且抗体在此细胞中比较特异),用制作好...
真核表达
载体有哪些
答:
4. 非整合型瞬时
表达
载体 非整合型瞬时表达载体主要用于实现外源基因在
真核细胞
中的瞬时表达。它们通常基于质粒或病毒载体构建,能够在真核细胞中自主复制并支持基因的表达,但并不会整合到宿主细胞的基因组中。这类载体适用于
蛋白质
的生产、药物筛选以及功能蛋白质组学等领域。以上是真核表达载体的几种...
真核
过
表达
质粒,原核过表达质粒的区别~急求~~
答:
一、指代不同 1、真核过表达质粒:
真核细胞
表达载体之一为pEGFP-N1载体,具有对方面的优点。pEGFP-N1载体上携带有EGFP
蛋白表达
基因。2、原核过表达质粒:能携带插入的外源核酸序列进入原核细胞中进行表达的载体。二、特性不同 1、真核过表达质粒:该质粒具有很强的复制能力,可以满足随宿主细胞分裂时...
真核细胞表达
和原核细胞表达有什么不同?他们表达产生的活性
蛋白
有什么不...
答:
首先得从细胞的结构说起:
真核细胞
具有各种胞内细胞器,而原核细胞却除核糖体之外不存在其他细胞器。这与基因的
表达
是密不可分的。真核细胞的基因是有外显子和内含子组成的,而原核细胞却无此之分。在细胞内DNA进行转录是都是从启动子开始,按照碱基互补配对原则依次进行。只是翻译产物会有所不同,...
为什么
真核
基因在原
核细胞
中
表达
出来的
蛋白质
常常失去活性
答:
1.
真核
基因多含有内含子,在原
核细胞
内,无法将内含子剪掉.合成的蛋白质就就不是正确的氨基酸序列,也无法折叠形成正确的空间结构(高级结构).而正确的空间结构是维持
蛋白质生物
学活性必不可少的.变性的蛋白质,之所以失去生物学活性,就是因为空间结构遭到破坏.2.蛋白质在内质网上的核糖体合成后,都有一...
真核表达
载体转染293,序列都正确,不表达是什么原因
答:
①不表达,从基因上开始分析,无论是用那种宿主
表达蛋白
,真核表达或是原
核表达
,都要考虑到基因优化的层面,如果基因本身不适在此系统中表达,那么下游在怎么优化也是不表达的 ②表达条件的优化,转染效率是否转染成功,细胞培养细胞生长的状态,这些条件是可以通过自己优化解决的 此外,
真核细胞蛋白表达
,...
真核蛋白表达
在
细胞
超声沉淀中该怎么办
答:
因为原
核生物
缺乏翻译后的修饰,所以
表达
的
真核蛋白
和真核中表达有所差异,可能没有生物学活性等,但是要是做免疫原应该没问题; 基因需为cDNA,不能含有内含子,原
核细胞
不能对mRNA进行剪切; 要分析DNA序列信息,分析其密码子,由于原核与真核。
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