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纯化后蛋白还有标签吗
蛋白质
提取.
纯化
的学习报告
答:
………(十) 永远的转录因子 第一个模块的实验结束
以后
,我们进入第二个模块的实验。这个实验的指导教授叫Al Courey。这个模块的实验主要是要从Hela细胞里
纯化
AP-1。AP1是一种很重要的sequence specific转录因子,在很多生理过程里都有作用。AP-1其实不是一种均一的
蛋白质
,实际上一种二聚体结构,要...
内参抗体和
标签
抗体
有
哪些
答:
PCNA mAb (1D7) 细胞核
蛋白
28 kD Abbkine A01040 小鼠源单克隆 COX IV mAb (14Y2) 细胞线粒体总蛋白 16 kD Abbkine A01060 小鼠源单克隆 Histone H3 mAb (2D10) 细胞核蛋白 18 kD Abbkine A01070 小鼠源单克隆
标签
抗体(Tag Antibody)可用于检测各种商品化表达载体上的标签序列(如: ...
从t载体上多余的酶切位点会不会影响表达
答:
一般都是组氨酸
标签
,便于后续的
蛋白纯化
。但是不要加的太长了,
还有
就是多出的碱基一定要是3个3个一组的,不能打破了你的蛋白的开放阅读框。多出几个残基对蛋白的影响不会太大,基本可以忽略。这个就要看你的启动子序列
之后
有没有ATG,如果没有的话就需要加入,有的话就不需要。
DNA粗提取后
有
很明显的条带,
纯化后
看不到条带,为什么 是不是说明原来DN...
答:
那个很明显的条带
有
可能不是DNA哦,用75%冰乙醇
纯化后
看不见条带说明DNA提取率低
经初步
纯化后
的
蛋白质
样品,如果用层析法检测显示只有一个峰,是否可以认...
答:
切完后再过柱子。如果
还有
原来的峰则证明有杂蛋白存在。第二种方法也类似。离子交换层析的原理是根据
蛋白质
的等电点来
纯化
的。电泳法也是根据分子量来判断。超速离心是根据沉降系数来分离的。这些都没办法彻底排除杂蛋白的影响。要排除得去考虑蛋白质的氨基酸序列。这样才能彻底排除干扰。
SDS-PAGE
蛋白
胶什么回收
纯化
答:
切了
之后
通电泳缓冲液装透析袋里,通电跑,之后拿出去胶,透析,浓缩。应该是这样的,不过损失超级大。有人这么做过,换个方法吧,我曾经也想这么
纯化
来着。
蛋白纯化
的主要步骤及应注意的细节问题
答:
有
生物活性的
蛋白纯化
时,需注意PH值,温度和变性剂等,防止蛋白变性失活。一般常规步骤:破碎组织或者细胞;离心取上清;分段盐析或者盐析;透析除盐;浓缩;柱层析(凝胶过滤、离子交换层析、亲和层析等)。
纯化
得到的
蛋白
跑电泳上样之前要变性吗
答:
要看是哪种电泳了,如果是SDS-PAGE就一定是需要将
蛋白
变性的,不加SDS的话蛋白是跑不下去的。如果是Native-PAGE就不需要将
纯化
得到的蛋白变性,这种PAGE是依赖分子量大小完成电泳的。
纯化
少量
蛋白
后如何浓缩
答:
两种样品中的
蛋白质
采用不同的荧光标记后混合,进行2-DE,用来检测蛋白质在两种样品中表达情况,极大地提高了结果的准确性、可靠性和可重复性。在DIGE技术中,每个蛋白点都有它自己的内标,并且软件可全自动根据每个蛋白点的内标对其表达量进行校准,保证所检测到的蛋白丰度变化是真实的。DIGE 技术已经在...
Abbkine的镍柱
纯化蛋白
买哪种亲和层析填料好?
答:
PurKine His-Tag Co-NTA Resin 6FF PurKine 组氨酸标签 Co(钴)-NTA树脂(6%交联)PurKine GST-Tag Glutathione Resin 4FF PurKine 谷胱甘肽S转移酶标签 谷胱甘肽树脂(4%交联)PurKine MBP-Tag Dextrin Resin 6FF PurKine 麦芽糖结合
蛋白标签
糊精树脂(6%交联)PurKine Biotin-Tag Streptav...
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