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纯化后蛋白还有标签吗
蛋白在包涵体里
纯化后蛋白
功能会受到影响吗
答:
蛋白在包涵体里
纯化后
也不会具有活性的,一定要通过包涵体复性重新折叠成具有活性的
蛋白质
。而因为复性的不确定性,绝大多数包涵体蛋白复性后不能完全恢复到天然结构。这样的蛋白在使用时都会对功能造成一定的影响。
带表位
标签
Flag的重组
蛋白
请问怎么
纯化
答:
一般用FLAG
标签
抗体偶联介质或者磁珠进行
蛋白
的
纯化
。
基因带六个his
标签
,
蛋白纯化
时为何挂不上镍柱求解
答:
所以不能变性后挂柱啊!各位
还有
什么高招啊?小妹先谢过了。zhaocy8903(站内联系TA)用其它
纯化
手段anik(站内联系TA)有可能是你的his
标签
掉了,另一个就是你的镍柱没有还原彻底。wjswj(站内联系TA)曾经傻乎乎的用TE缓冲液溶
蛋白
去挂镍柱,结果……后来想想真好笑:)txstbbm(站内联系TA)这样呀,...
需要大量
纯化
细胞表达的重组
蛋白
,但有DNA残余,怎么去除DNA影响_百度知...
答:
加点核酸酶溶解掉核酸,我们实验室
蛋白纯化
都是用柱子纯化,没有用过滤的,而且过滤的话纯化效果应该很差,杂质太多
纯化蛋白
样品后没放冰箱
答:
失活变性。
纯化蛋白
样品后没放冰箱是会造成失活变性的,因为纯化蛋白样品的保存时间是很短的。蛋白质(protein)是组成人体一切细胞、组织的重要成分。机体所有重要的组成部分都需要
有蛋白质
的参与。
带有his tag的
蛋白
跑胶的位置到底是多大
答:
是这样的,his
标签蛋白
就是:六个组氨酸。一般存在于重组蛋白前面或后面,便于
纯化
该重组蛋白,组氨酸可以特异性的结合镍离子,带有组氨酸标签的重组蛋白可以被镍柱吸附,从而达到纯化的目的。也就是在表达载体上面,特别加六个组氨酸的碱基序列,就可以了,一般商业载体上面都有。该清楚了吧。
内含肽的分离
纯化
答:
内含肽具自切割特性的这种特性而实现目标蛋白与亲和
标签
分离的目的。内含肽在
蛋白质纯化
中的应用修饰后(位点特异性突变)的内含肽经诱导能够介导N端或C端单侧肽键断裂。首先将编码亲和标签、内含肽及目标蛋白的基因序列连接在一起,在合适的宿主系统中表达出一个标签-内含肽-目标蛋白的三联体,利用修饰后的内含肽构建的...
纯化后
的
蛋白
做western,出现很明显的两条带,请问是二聚体吗
答:
煮沸时间不够使得
蛋白质
变性不充分或者形成二聚体会导致实验效果不好,煮过头的情况我也没有遇到过(貌似还没有碰到人煮个5-10分钟还会煮成一小时的- -|||),不过肯定的是变性已经充分.可以试一试,当然也有可能蛋白质长时间高温沸水作用下部分降解.
怎么利用层析法
纯化
酶如何确定目的
蛋白
?
答:
纯化蛋白
最有效的就是亲和层析,是通过目的蛋白与相匹配的固定化配体的进行特异性结合,实现纯化目的。最显著的特点就是,良好表征的
标签
与其对应的固相偶联的配体的结合,能够对标记蛋白单步操作实现亲和纯化。融合标签的抗体也被广泛用于下游检测和实验,从而无需针对每种特定重组蛋白去开发相应的探针。抗体...
组氨酸
标签
怎么加
答:
原核表达用PET32载体,载体自带上
有
组氨酸标签。his
标签蛋白
就是:六个组氨酸。一般存在于重组蛋白氮端或碳端,便于
纯化
该重组蛋白,组氨酸可以特异性的结合镍离子,带有组氨酸标签的重组蛋白可以被镍柱吸附,从而达到纯化的目的。也就是在表达载体上面,特别加六个组氨酸的碱基序列,目的就是纯化。含义 在...
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