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蛋白原核表达
检测
原核表达蛋白
没有需要将菌体超声波破碎吗
答:
检测
原核表达蛋白
不需要将菌体超声波破碎的,原因如下:1、如果是仅仅检测
原核蛋白
是否有表达,可以直接将菌体重悬于蒸馏水中,并使用SDS-PAGE的方法检测。2、如果需要检测原核蛋白是否有可溶表达,则需要将菌体超声波破碎之后再检测是否有可溶表达。3、所以检测原核表达蛋白不需要将菌体超声波破碎的。超声...
在做
原核表达
时带his组氨酸的目的
蛋白
怎么也结合不上镍柱,为什么?_百度...
答:
首先找一种正常的标签
蛋白
进行一下纯化试验,如果能够纯化出来那就是你的蛋白的问题,可能是蛋白在
表达
的时候非正常折叠,标签被折叠在内部,没有在蛋白表面游离着,这样的话当然不会被镍柱捕获了。比较严重的情况就是包涵体的形成,是否形成包涵体你可以根据蛋白的性质反应或者是电泳检测一下离心后的细胞...
原核表达
,为什么空载表达的很好,目的
蛋白
没有表达,可能的原因有什么...
答:
目的
蛋白
的
表达
跟基因本身关系密切,载体,表达条件关系也很大。空载体能表达不代表你的蛋白能在该条件下表达。
构建的
原核表达
载体,测序也正确,为什么有的就不表达目的
蛋白
?
答:
先测序看看序列是不是三的倍数,保证是连接到载体上,并且载体也是转入
表达
菌的,不行的话,通常做法是调节诱导剂浓度,诱导时间,不行就换载体,如BL21换ROSSETTA等,再不行就换载体。其实我也遇到,有个
蛋白
始终没有表达,没办法放弃了。
异源
蛋白表达
重组蛋白表达的系统
答:
在现代工业、医疗和基础研究领域,蛋白表达扮演着核心角色,是生物技术领域的关键挑战和研究热点。重组蛋白表达的策略多种多样,主要包括:首先,
原核蛋白表达
系统,以大肠杆菌表达系统为例,其优势在于遗传背景清晰、成本低廉、高表达量以及产物分离纯化相对简单。然而,其不足之处在于,由于缺乏完整的翻译后...
原核表达蛋白质
的时候出现了两条带,是什么原因呢
答:
是不是形成二聚体了?或目的
蛋白
内部有某个酶的位点,被水解掉一段
基因的克隆与
原核表达
有啥意义
答:
基因的克隆可获得你需要的新基因;
原核表达
可以获得你需要的
蛋白质
在
原核
生物中
表达
真核
蛋白
应注意什么问题?
答:
1.你要
表达
的真核
蛋白
是做什么用,因为
原核
生物缺乏翻译后的修饰,所以表达的真核蛋白和真核中表达有所差异,可能没有生物学活性等,但是要是做免疫原应该没问题 2.首先要看其序列信息,分析其密码子,由于
原核
与真核生物的密码子偏好性不同,所以有时可能会出现稀有密码子而影响表达的情况 3.要...
外源基因在
原核
细胞中
表达
时
蛋白质
的存在形式有哪些?
答:
1. 游离
蛋白质
(Free proteins):外源基因被转录和翻译后,产生的蛋白质可以以游离的形式存在于细胞质中。这些蛋白质可以执行其特定的功能,例如催化化学反应、结合DNA或其他分子等。2. 融合蛋白质(Fusion proteins):有时,在外源基因
表达
时,可以将外源基因与宿主细胞中的其他蛋白质基因进行融合,生成...
为什么有些在
原核
细胞中
表达
的真核
蛋白
没有生物活性 求稍微详细一点的答...
答:
因为在原核细胞中表达真核蛋白,
蛋白质
在表达完缺少部分修饰,如:糖基化,进一步折叠等等,所以没有像真核细胞表达出来的蛋白那样有活性,再者,
原核表达
很有可能会过表达,蛋白之间会形成包涵体,也会导致蛋白失活,这样可能得变形复性后才能从新有活性。
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