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IPTG过量会抑制蛋白表达嘛
原核
表达
系统中常用的调控元件有哪些?
答:
gene activation protein)因子和camp来激活启动子,促使转录进行。负调控则是由调节基因产生lacz阻遏蛋白,该阻遏
蛋白能
与操纵基因结合阻止转录。乳糖及某些类似物如
iptg
可与阻遏蛋白形成复合物,使其构型改变,不能与o基因结合,从而解除这种阻遏,诱导转录发生。(2)trp启动子:它来自大肠杆菌的色氨酸操纵...
向培养基中加0.05%葡萄糖有助于
蛋白表达
吗
答:
这个应该是跟乳糖操纵子有关,在葡萄糖存在下,乳糖操纵子不
表达
的。有利于诱导前质粒的稳定,
抑制
加
IPTG
前培养基中少量乳糖的诱导 建议你用0.3陪的LB加M9培养基,当A600达到1.5左右时25度过液诱导
什么是原核
表达
系统?
答:
gene activation protein)因子和camp来激活启动子,促使转录进行。负调控则是由调节基因产生lacz阻遏蛋白,该阻遏
蛋白能
与操纵基因结合阻止转录。乳糖及某些类似物如
iptg
可与阻遏蛋白形成复合物,使其构型改变,不能与o基因结合,从而解除这种阻遏,诱导转录发生。(2)trp启动子:它来自大肠杆菌的色氨酸操纵...
原核
表达
系统中通常使用的可调控的启动子有?
答:
gene activation protein)因子和camp来激活启动子,促使转录进行。负调控则是由调节基因产生lacz阻遏蛋白,该阻遏
蛋白能
与操纵基因结合阻止转录。乳糖及某些类似物如
iptg
可与阻遏蛋白形成复合物,使其构型改变,不能与o基因结合,从而解除这种阻遏,诱导转录发生。(2)trp启动子:它来自大肠杆菌的色氨酸操纵...
包涵体纯化
蛋白
复性案例分析——钟鼎生物
答:
IPTG
诱导
蛋白表达
,经12% SDS-PAGE分析,目标蛋白主要存在于沉淀中,结果如图所示 图1 蛋白表达鉴定SDS-PAGE分析 Fig.1 SDS-PAGE analysis of expression M: 蛋白质分子质量标准 1: 未诱导 2: 诱导后 3: 诱导破碎后上清 4: 诱导破碎后沉淀 包涵体蛋白的变复性 1. 将菌体沉淀重悬于20 ml 裂解...
请问有人知道基因克隆载体中PGEX的特点吗?
答:
pgex特点就是带有GST标签,可以增加目的
蛋白
的溶解度,别的没什么特点,属于大众型载体,目前也较常使用。你说的没有
表达
有没有做全菌的sds-page啊,不管是不是形成包涵体全菌电泳都应该有条带,至于形不形成包涵体就取决于你的
iptg
浓度和诱导温度了,iptg越低,温度越低可溶性越好,我们曾做过0.1的...
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