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原核表达的蛋白大小比预测小
原核表达蛋白大小
偏小
答:
表达
出来
的蛋白比
实际
大小
要小,这是为什么?2019年9月25日 | By Annsci0 主要原因有如下几个方面 蛋白本身被降解了,可以存在一些不利于该蛋白稳定的蛋白酶 翻译起始位点的问题:如果一个类似于核糖体结合位点(AAGGAGG)的序列加上适当的间隔序列出现在了ATG密码子上游,降解就会有可能出现。解决的方法...
异源
表达
系统中
蛋白质
的糖基化对sds电泳有没有影响
答:
1.影响一:分子量的估算 糖基化会增加
蛋白质
的分子量。在SDS-PAGE中,蛋白质通常是根据它们的分子量来分离的。由于加上的糖链增加了蛋白质的整体分子量,因此糖基化蛋白质在凝胶上的迁移可能与预期的基于蛋白质氨基酸链的分子量不一致。2.影响二:荷电状态 尽管SDS的存在通常能使蛋白质带有统一的负...
原核表达
分子量特别小,跑胶是不是看不到啊
答:
如果是蛋白的话,这个和分子量大小其实没多大关系
,一般分子量小的话,你需要根据你的蛋白预测大小来调整PAGE胶的浓度,选择合适的浓度胶来跑,不然你的蛋白会因为跑出胶而看不到。然后如果你的胶浓度正确的话(一般看和你蛋白对应的Marker是否跑出胶),还看不到蛋白带,那么只有可能是你的蛋白表达量...
原核
生物中
表达
真核
蛋白
应该注意什么问题
答:
要注意你要
表达蛋白
的
大小
问题,一般情况下大于70KD
的蛋白
在原核菌种不容易表达或表大量低;
原核表达
出来的一般是包涵体,所以蛋白的复性很关键,否则表达出来了也不能用,没有活性。
利用
原核表达的蛋白
表达量怎么越来越低了?
答:
如果楼主你的实验设计没任何问题,并且你的实验步骤也很严谨的,但是你就是找不出原因来的哈耶正常哈!生物实验有时很诡异的!~楼主你也不要着急哈,你换个人或者换个环境再做做看看,所不定就行了!~~~楼主好运!!!~~~
为何
原核
细胞的各种功能对应的结构比真核细胞简单那么多?
答:
第二个证据是叶绿体和线粒体都有自己的DNA和核糖体,它们的DNA都有环状结构。这些结构和古老细菌的DNA有着明显的相似,并且也包含很多相似的基因核糖体,叶绿体和线粒体
的蛋白
质组成机器,也和古代细菌的核糖体有类似的结构,但是它们和在细胞的其他地方的核糖体不同。最后,想想在这吞噬过程中的细胞膜。
原核表达
时跑完电泳,条带应该是多大,是和自己的目的基因
蛋白
的分子量一...
答:
原核表达的蛋白
是没有修饰作用的,一般而言电泳表观分子量应该与蛋白分子量+标签的
大小
一致。但有时候会有一定的迁移,比如用pet28a表达的蛋白进行电泳时表观分子量会
比蛋白
分子量+标签大5kD左右。不过通过对比未诱导的阴性对照能很清楚地看出来自己表达的蛋白。
如何确定一个
蛋白
选用真核表达还是
原核表达
、
答:
一般真核生物来源
的蛋白
质用真核表达,原核生物来源的用
原核表达
,因为真核生物和原核生物有密码子偏好,比如说同一个氨基酸可以由A和B两种密码子编码,真核生物偏好A,含有A的序列在真核中表达量较高,否则,含有B的序列表达量很低.
原核表达蛋白
与原材料提取蛋白相比有何优缺点
答:
原核蛋白表达
系统既是最常用的表达系统,也是最经济实惠
的蛋白表达
系统。原核蛋白表达系统以大肠杆菌表达系统为代表,具有遗传背景清楚、成本低、表达量高和表达产物分离纯化相对简单等优点,缺点主要是蛋白质翻译后缺乏加工机制,如二硫键的形成、蛋白糖基化和正确折叠,得到具有生物活性的蛋白的几率较小。
相比真核表达系统,
原核表达
系统的劣势体现在
答:
一、
原核表达
体系 1、E.coli是当前采用最多的原核表达体系,其优点是培养方法简单、迅速、经济而又适合大规模生产工艺,其缺点为:由于缺乏转录后加工机制只能表达克隆cDNA,不宜表达真核基因组的DNA;由于缺乏适当的翻译后加工机制,表达产物无修饰过程,分子构型可发生改变。2、
表达的蛋白
质常常形成不溶性...
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